排卵試紙的原理，是通過檢測黃體生成激素的峰值水平來預測是否會排卵。女性排卵前的24-48小時，尿液中的黃體生成激素會出現高峰值，用排卵試紙檢查會出現陽性的結果，意味著將在24-48小時內排卵，這時候同房受孕幾率會比較高。對於月經周期規律28天的女性，可以從月經的第11天左右開始，每日固定的時間留取尿液進行檢查。留尿前的兩小時，避免大量飲水，以免造成尿液稀釋，影響檢查結果。如果排卵試紙上出現兩條色帶或深於對照線的色帶，就表示黃體生成素已經出現峰值，意味著將在24-48小時內排卵；如果試紙上出現一條色帶，就表示沒有排卵；如果一條色帶都沒有，就表示試驗出現問題，可能是檢測方法不對或試劑失效，應用新的試劑條重新測試。所以，用有效的排卵試劑檢測，至少會出現一條色帶，排卵試紙檢測出現陽性的結果後，意味著將在24-48小時內排卵。
