1、高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測。
2、高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:
(1)高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為瞭能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
(2)高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小於1小時。
(3)高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
(4)高靈敏度:紫外檢測器可達0。01ng,進樣量在μL數量級。
(5)應用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。