1、首先，可以觀察外形來判斷：雄龜：肚皮是凹的，個體較小，龜殼黑色，軀幹權部長而薄，尾長柄細；雌龜：肚皮是平的，個體較大，龜殼棕黃色，縱棱顯著，軀幹部短而厚，尾短柄粗。
2、其次，我們可以根據氣味來判斷：烏龜的雄體有濃烈異味，雌龜有較淡的異味。
3、再則，我們還可以根據排泄孔位置及形狀來判斷：公龜的位置接近尾端，孔形長形。母龜的位置接近腹甲，孔形圓形。
4、除此之外，我們還可以根據繁殖期的表現情況來判斷：抓住成龜，當它的四肢和頭尾皆欲縮人殼內時，用手指使勁住它的頭及四肢，不讓它有時間呼吸，此時烏龜泄殖孔內即排出副膀胱水，然後生殖器慢慢地外突，若隻向外突出縱列的皺紋內壁者為雌龜。
